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当前位置 〉 信息文章 〉技术支持 〉BEX CUY 21 EDIT II的“杀手锏”使基因转染效率达到前所未有的高度

    说到转染,大家最先会想到的恐怕就是脂质体转染。诚然,像293、Hela等细胞系,脂质体转染也能达到70-80%。而,对于其他一些极娇贵的细胞,如原代神经元,原代神经干细胞等来说,脂质体转染不仅转化效率很低(最高10%),而且细胞死亡率极高。那么这种情况下,研究人员就会转而投向更加昂贵而且毒性更大的病毒包裹方法上去。经过反复的摸索,最终将转化效率提高了,但是,细胞在后续培养中,死亡率很高,细胞自然的生理生化特性遭到破坏,无法后续实验。这时,电穿孔方法就是那最后一根救命稻草。
    上个世纪80年代世界第一台电转化仪诞生。它的波形就是单向高压方波的重复轰击。在这种条件下,细胞死亡率极高。如小鼠精原干细胞这种脆弱的细胞就会全部死亡。


     
    所以,有些系统就整合了这两部分功能,配备特殊试剂的电转化仪应运而生。它延续了传统的方波,并设定了固定的参数。的确,这种模式的诞生,较之前一种模式提高了转化效率,降低了死亡率。但也就是这一功能,被普遍认为是“黑匣子”,因为客户只能知道他的细胞转染用的是几号程序,具体参数是怎样的,不知道!更无法优化设定参数!而且,为了提高转化效率,每换一种或几种细胞,就必须重新购买不同的转染试剂,这点也是多数客户难以接受的“霸王条款”。而离开这些特殊的转染试剂,这个仪器基本是被实验室闲置了。
    那么,无需特殊转染试剂辅助,又能显著提高转化效率的电转化仪的研发就成为细胞转染的发展方向。
    1990年,BEX公司诞生。并成为日本唯一专业研发,生产电转化仪和细胞融合仪的厂家。他公司生产的CUY21一经推出,即得到广泛好评,已有超过2000台的CUY21全系列转化仪服务于全球科研工作者,并持续20多年依然在该领域保持无法逾越的高度。
    2012年10月,回顾经典,BEX再次发布具有历程碑意义的超级多脉冲活体/细胞电转化仪CUY21 EDIT II。该电转化仪无需特殊试剂即可得到极高的转染效率,尤其是极难转的细胞系,如原代神经元的转染,可以达到50-60%。这一突破解决了长久以来原代细胞转染存活率低、转化效率低下,价格昂贵的问题。因此,许多受益的学者很想了解到底是什么,彻底改变了他们对电转化仪的认识。
    归根结底,就是CUY21 EDIT II的“杀手锏”正反动态衰减方波脉冲模式。


     
    大家都知道,衰减指数波脉冲比方波脉冲具有更好的转化效率,衰减指数波脉冲可以转化具有坚硬外壁的细菌和酵母,但由于波形尖锐,如果转染动物细胞,容易引起细胞死亡;方波脉冲转化效率比指数波低,但波形柔和,适合转染动物细胞,具有高存活效率,但转化效率比较低。BEX能够把这两种波形技术融为一体,就是上面的动态衰减方波。我们这一年半的时间,用CUY21 EDIT II 转化过的细胞超过百种,其中多数都是极难转染的细胞,包括大鼠胚胎原代神经元细胞、NIH/3T3、NG108-15、raw264.7、SSC、HepG-2、N2a、PC3、LCL、NIT1、小鼠胚胎原代干细胞以及细胞系,和原代小鼠β胰岛细胞团、人B细胞系、人淋巴细胞等等,达到的转染效率我们十分欣喜。
    BEX CUY21 EDIT II 也涵盖了其他波形。如静态衰减脉冲,恒流脉冲。这两种波形被指定为活体转染脉冲模式,原因就是方波的波形柔和,而且对活体电转来说存活率就显得非常重要。特别是独有的恒流脉冲,使得CUY21 EDITII 成为世界上唯一一台可以成功转染成年鼠脑的电转化仪。倘若用这种模式转染细胞,转染效率就比动态衰减脉冲要低些。
    我有作过对比试验,分别用动态衰减脉冲模式,静态衰减脉冲模式和脂质体转染方法平行对小鼠胰岛瘤β细胞系进行转染。结果很明显:
     
    综上所述,BEX CUY21 EDIT II 动态衰减脉冲模式最大程度的提高了转染效率,同时保证了细胞的存活率,为极难转染细胞的研究开辟了新的一页。

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